目的:初步探讨复发性口腔溃疡(recurren t oral ulcer, ROU)患者的发病与其口腔中的幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)之间 的关系。方法:通过聚合酶链反应(polymer ase chain reaction, PCR),对每位ROU患者口腔中6个不同牙位龈上、龈下共12份菌斑进行 检测,同时设立健康对照组,比较两组检测结果。结果:共检测ROU 患者72例,对照组94例;Hp阳性率分别为56.94%和28.72%,差异非常显著(P<0.01) ;且轻 型ROU患者Hp阳性率明显低于重型ROU患者(P<0.05)。结论:ROU 的发病与口腔中Hp感染可能有关,其致病机理尚待进一步研究。复发性口腔溃疡(recurrent oral ulcer, ROU)又名复发性阿弗他口炎(rec urre
nt aphthou s stomatitis, RAS)、复发性口疮(recurrent phthae),是口腔粘膜病中最常见的一种。病 因目前尚不十分清楚,国内外学者虽然作了大量研究,提供了许多与该病有关的因素,但均 未得到充分的证实。本文通过对72例ROU患者口腔中不同牙位龈上、龈下菌斑进行Hp-PCR检 测,发现ROU的发病可能与Hp相关。
1 材料和方法
1.1 检测对象
分为ROU组和对照组。ROU组均按全国统编教材《口腔内科学》第三版标准进行诊断,共72例 ,男42例,女30例,年龄9~47岁。对照组为自愿受检者(非ROU患者),共 94例,男55例,女39例,年龄10~52岁。条件控制:①所有受检者取样 前1周内未服用任何抗生素、铋剂、抗酸剂及H2受体拮抗剂,1月内未服用类固醇类药物 或非类固醇类抗炎药,如阿司匹林等;②所有受检者均不考虑是否为胃炎、胃溃疡等与Hp感 染有关的上消化道疾病患者,但须无严重全身性系统疾病,非Ⅱ度或Ⅱ度以上牙周炎患者; ③两组间年龄、性别、取样牙位和方法、患者牙周条件等可控制因素通过均衡检验,证实无 差异,具有可比性;④ROU患者按轻型ROU、重型ROU和疱疹样ROU分类,然后分别观察其Hp 阳性率检测结果的差别。
1.2 实验方法
所有受检者检测早晨均按指导刷牙,取样前用无菌生理盐水轻轻将口腔漱干净,然后刮取每 位受检者前牙、前磨牙、磨牙上、下颌各1个牙位,尽量取牙周情况较好的牙齿的龈上、龈 下共12份菌斑,置于无菌生理盐水的尖嘴离心管,-40℃保存备检。
将备检菌斑放入400μl无菌生理盐水溶液中离心12 000r/min×5min,弃上 清 ,加DNA裂解液50μl,蛋白酶K 2μl, 55℃孵育1h,100℃水浴10min,同时设置阳性模板 和阴性对照(Pacific Econ-Tech Co. USA PCR试剂盒);15 000r/min×5min离心后,取5μ l进行PCR检测。取PCR扩增产物15μl,用15g/L琼脂糖凝胶 (含0.5g/L溴化乙锭)经TAE电泳缓冲液,电泳30min(电压5v/cm)后在紫外透射反射仪300nm下 观察结果,如果在200bp处出现橙黄色条带,则诊断为Hp阳性(+);每一位受检者12份牙菌斑 中只要有1份Hp阳性,则该受检者口腔Hp检测结果统计为阳性。 |