2．2  继发龋牙本质标本中有机酸测量结果
    所有继发龋牙本质标本中均检测到乳酸、甲酸、乙酸、丙酸和丁酸存在，10例标本中还检测到戊酸，正常牙本质标本中仅检测到极少量乙酸，其含量为(0．002 2±0．0400)g／L.各组分有机酸的保留时间及平均含量见表1。由表1可知，继发龋牙本质标本中测得的有机酸含量由高到低依次为甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、丁酸和戊酸。其中以甲酸、乙酸和丙酸含量较高，是继发龋牙本质中的主要有机酸，占所有有机酸组成的93％。 表1 各组分有机酸的保留时间及平均含量 讨论 测定有机酸的方法很多，一般有比色法、柱色谱法、纸色谱法和目前常用的气相色谱法。比色法只能测单个酸，不能测定混合酸；柱色谱法和纸色谱法分离时间长，试剂用量大，准确度低，重现性差「2」。气相色谱法分析有机酸一般采用衍生化法，其中包括甲酯化法、已酯化法和苄酯化法。这些方法样品处理都很复杂，所需时间长「3」。前3种方法均需加入催化剂在高温下反应，苄酯化法虽可在常温常压下反应，但需使用剧毒的苄基溴。我们根据高分子多孔微球的特性及应用，进行直接进样法的研究，选择了最佳操作条件，成功地分离龋牙本质标本中的短链有机酸。对于样品处理，我们采用保留值小、影响小的双蒸水作为溶剂，样品加偏磷酸酸化，离心后直接进样。我们探索了在龋牙本质样品中乳酸的气相色谱单独分析方法，在样品中加入过量高碘酸，混匀后直接进样，试验证明样品经简单的前处理即可进行分析，该法简单、灵敏、快速、分析周期短(2．11 min)，结果令人满意，对于测量龋损标本中的乳酸含量有实际应用价值。 本实验结果表明，所有继发龋牙本质标本中均检测到有机酸存在，支持有机酸在龋病发生、发展过程中具有重要作用的观点。 银汞合金、树脂充填体、金属全冠修复体修复的患牙，其继发龋牙本质中具有相似的有机酸组成，即甲酸、乙酸和丙酸含量较高，丁酸、乳酸和戊酸含量较低，表明各类继发龋微生物的组成是相似的。由于充填体或修复体下方外源性碳水化合物的来源有限，因此，细菌降解内源性胶原蛋白可能是这些有机酸的主要来源。据报道，深层龋牙本质中内源性蛋白酶活性高于浅层龋损牙本质，丙酸杆菌、珠网菌和优杆菌较多见于深层龋损牙本质，而这些细菌在没有外源性碳水化合物存在的情况下，能够降解胶原蛋白产生乙酸、丙酸和丁酸，胶原降解性细菌在继发
龋的发生、发展过程中具有更为重要的作用「4」。 近来Hahn等「5」报道了两种牙本质龋类型，其中一种牙本质龋含有大量的产乳酸菌如链球菌、乳酸杆菌，另一类乳酸杆菌的含量很少。在碳水化合物存在的情况下，变形链球菌和乳酸杆菌能将其分解产生大量乳酸。根据本文的研究结果，继发龋中有机酸以甲酸、乙酸和丙酸为主。